难以“捉”摸的维生素D

通过5年的终端使用,近500万条的检测用量,ca88手机版入口维生素D已不断发展成为一款兼具简便快捷与准确的检验产品。今年我公司25-OH-VD满分通过卫生部临检中心的第一次室间质评,是对这些年我们对这一产品的充分肯定。VD检测究竟要点几何,且听ca88手机版入口为您细细道来。

      维生素D是维持人体正常钙磷代谢、免疫功能、细胞增殖分化等一系列生理过程的重要脂溶性维生素。维生素D在体内的代谢形式包括25-OH-VD、1,25-(OH)2-VD、24,25-(OH)2-VD等。而综合稳定性、灵敏度等各种因素,25-OH-VD是体现体内维生素D浓度的优良标志物。


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维生素D检测的难点


随着国民素质的不断提高,人们对维生素D重要性的认识也在不断增强。因此,对25-OH-VD的检测需求也随之不断增加。而25-OH-VD属于小分子物质,对其检测产生的难点也就随之产生了。


比喻而言,我们在血液中对某一物质浓度进行检测、分析,就如同用一张渔网在海洋中在一定时间内对特定大小的鱼群进行捕捞,进而由捕捞量去判断海洋中的鱼群数量的过程。从这个比喻出发,对25-OH-VD这条小而精巧的“鱼”来讲,我们常用于对特定蛋白质检测所用的“网”就显得精度不足。


走出困境


为了走出这一困境,我们有两种解决方案:编织更为细密的“网”以及创造更大的“鱼”。


从“网”出发,我们使用镧系元素Tb、Sm等以提高检测精度。镧系元素在游离状态下,发出的光谱信号很微弱。但其螯合物却可以在紫外光源的激发下形成可靠的光谱信号。其具有较宽的激发光谱带和较窄的发射光谱带,发光持续时间长且光谱的Stocks位移较大,可排除激发光以及非特异性光源对检测产生的干扰。

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此外我们还对我们的“网”——即检测仪器做了如下处理:


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      (1)激发LED灯作为光源;

(2)尽量增大聚焦/准直透镜组的组数及最大孔径;

(3)尽可能提高分色镜对激发光的反射率及透射率。


从“鱼”出发,25-OH-VD的检测难点主要存在于其“小”的特点上,我们可以根据其特性对其进行修饰,人为地将这条小鱼变成易于捕捉的大鱼

具体而言,25-OH-VD属于胆固醇衍生物,其保留了胆固醇的特性,即甾核几乎处于同一平面上,C-C键不能自由旋转。对于其生化代谢而言,在25-OH-VD的环状结构与不饱和键中,隐藏着太多可以将它“扩大”的钥匙。


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      举例说明,25-OH-VD中位于C25的羟基易于发生一系列酯化反应从而形成胆固醇酯。我们可以利用这一反应对待测样本的25-OH-VD进行人为“扩大”:在人体脂肪的代谢中会不断产生一种叫做“脂酰CoA”的大分子物质,它可以与维生素D的羟基发生酶促反应而结合成酯类物质,这一酯类物质既保留了绝大部分25-OH-VD的结构,又在另一端结合了一种大分子辅酶。我们可在特定酶的催化下快速完成这一过程。

除以上两个大的方面的指导,在检测中各种小细节同样影响着对25-OH-VD检测的精确度。我公司必将在已有基础上精益求精,在保留POCT简便快速特性的前提下,把握客户需求,向突破更多的技术难点而进军。


ca88手机版入口25-OH-VD产品室间质评成绩汇总


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ca88手机版入口25-OH-VD室性能


(1)与进口化学发光VD检测对比实验

我公司25-OH-VD检测自2014年推出以来,已历经500余万次临床检验的考验。在东北地区某医院和进口发光的对比验证实验结果如下图所示:


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根据ca88手机版入口25-OH-VD与进口发光VD检测数据进行线性拟合,得出两者线性拟合方程为y=0.9759x+0.1203,R2=0.9745。在对比实验的线性方程y=kx+b中,k值越接近于1,b值越接近于0,系数R2越接近于1,说明进行对比的两结果相关性越好。本对比实验中,k=0.9759,b=0.1203,R2=0.9745,这些数据说明ca88手机版入口25-OH-VD检测结果与进口发光VD检测结果数值差异小,相关性非常好。


(2)分析特异性抗干扰实验

根据中华人民共和国卫生部和国家标准化管理委员会颁布的《干扰试验准则》确定干扰物及浓度:100ng/mL的维生素D溶液,平行20张检测卡进行25-OH-VD检测。最终所有20次检测结果无一次高于5ng/mL。

(3)重复性实验

重复测定低浓度(20ng/mL)和高浓度(60ng/mL)的两批25-OH-VD血清(重复6次),计算得CV分别为7.63%与6.38%,满足CV<15%的行业要求。

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综合而言,ca88手机版入口25-OH-VD检测试剂是性能可与进口发光媲美的可靠产品。可以为医患甚至是我国的卫生健康事业提供优良的、有保障的服务。